执业兽医动物生物化学辅导资料之核酸分析技术
①分子杂交技术:1、soufhern-印迹:检测被转移DNA片段中特异基因;2、northem-印迹:检测特异基因的表达;3、斑点印迹杂交:用于核酸样品的定量检测;4、原位杂交:用于挑选喊插入序列的菌落。
②核酸工具酶:主要有限制性核酸内切酶(被称为“手术刀”)、DNA聚合酶、DNA连接酶、碱性磷酸酶等。
③PCR技术:1、聚合酶链式反应,称为基因的体外扩增。2、包括三个步骤:双链DNA的高温变性→引物与模板低温退火→适宜温度下的引物延伸。3、每一循环中新合成的子链及其模板均作为下一循环的模板,于是特定的DNA序列的产量随着循环次数成指数增长。
④DNA指纹技术:包括限制性片段长度多态性、DNA指纹图谱。原理:个体从亲代到子代时,DNA被剪切后多种片段是特异的。
⑤转基因技术:将所有外源DNA或目的的基因导入细胞或受精卵中,以研究DNA的结构功能,或获得目的的基因的表达产物的技术称“、、、、、”。显微注射法是应用最广泛成功的。
AMP:腺苷一磷酸 ADP:腺苷二磷酸 ATP:腺苷三磷酸
T:胸腺嘧啶 C:胞嘧啶 A:腺嘌呤 G:鸟嘌呤 U:尿嘧啶。
丙酮酸氨化→丙氨酸 α--酮戊酸氨化→谷氨酸 草酰乙酸氨化→天冬氨酸
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