褐藻配方对犬猫口腔健康指数的影响

摘要
    在两岁及两岁以上的犬猫中，66%以上的犬猫会出现牙周病症状，且这个比例会随着年龄的增长而增长。尽管治疗牙周病的方式和方法存在很多，但是，牙菌斑控制仍然是预防和治疗最重要的手段。本研究的目的是评估含有褐藻的配方对犬猫牙周病的临床效果。
    兽医临床上最常见的牙科治疗，如口腔卫生，是控制牙菌斑积聚的最佳条件。牙菌斑是引发牙周病的主要因素。牙齿上可见的牙垢本身不是疾病，而是口腔不卫生和牙菌斑最终矿化的表现。牙垢会引起牙菌斑的积聚，因机械性刺激导致黏膜溃疡。在进行正确的牙菌斑预防措施几个小时后，唾液糖蛋白开始堆积在牙齿表面。薄膜，或者说是这些薄层糖蛋白，通过在口腔中的细菌迅速（几小时后）定植。因此，牙菌斑可能会沉积在最近清洁过的牙齿表面，甚至在清洁后的第二天就开始沉积。细菌定植在薄膜上并伴随有食物残渣、脱落的口腔上皮细胞和微生物。在初始阶段，所谓的“不成熟”的牙菌斑形成了薄薄的牙齿沉积物。当沉淀在牙齿表面时，牙菌斑继续粘附在牙釉质上，甚至粘附的更坚固，形成一个更多的组织结构，变成某种细菌和原生动物群----从而转变成生物膜。这种生物膜的表面生长着好氧菌，而在接近于牙齿表面的更深层则生长着 厌氧菌。
    基质构成成熟菌斑的75%，在成熟牙菌斑中发挥着越来越重要的作用。基质是一种物质，包含分泌物和牙菌斑微生物代谢物质，将促使牙菌斑的积聚，保护牙菌斑免受化学和细胞杀菌物质的影响 .
    一旦成熟的牙菌斑形成（这个阶段持续几个小时以上），在接下来不受到干扰的两天里，生物膜慢慢地矿化，形成牙垢。
    牙垢本身不是病原菌；但是，它为定植病原菌诱导牙周疾病创造了条件。这些病原菌毒素将引起牙龈组织的炎症（牙龈炎）。如果不及时治疗，牙龈炎将发展成不可逆的牙周炎症（牙周炎），这意味着牙周膜系统的永久性损伤以及牙槽、牙龈和牙骨质的萎缩。

牙周疾病的预防–研究
    由此得出一个结论，为了防止牙周疾病，必须防止成熟牙菌斑的形成和矿化。此外，如果进行牙菌斑预防措施后兽医没有给予牙菌斑控制的卫生建议或者宠物主人不遵守兽医给予的卫生建议，牙周状况开始恶化的症状在接下来跟踪访问期间立即就会被发现。
    大量的研究表明，每天刷牙是预防牙周病最有效的方法。除了刷牙，干粮，特别是许多的咀嚼食品也起到至关重要的预防作用。新的预防牙周病的手段和方法，也同样受到追捧。预计这些新的方法能满足宠物主人们的需求，尤其是那些希望能有一个简单、经济和轻松方式解决宠物口腔卫生，且自己不用参与太多，但却能实现（最好是完全实现）上述描述的有效防止牙菌斑的宠物主人们。
    在美国进行的遵守口腔卫生保健建议的研究表明，24%的宠物在保健后的每天给宠物刷牙超过6个月，另外还有29%的宠物主人执行一周给宠物刷几次牙。总而言之，可以得出一个结论，超过一半（53%）患病的宠物在一个相对较长的时间内都提供了全面和有效的卫生护理。这些研究人员表示，调查结果是基于电话采访的，无任何手段可以验证患病的牙齿是否真的刷了以及刷的是否干净，也无法验证这种口腔保健对口腔健康是否有积极的影响。此外，这些研究中仅包括之前决定给宠物进行牙齿预防并花钱为宠物治疗牙周疾病的宠物主人。作者的研究经验表达了不那么乐观的看法，但是，必须记住的是，这个研究是基于所有患者的大小复杂的组合，对于本身是否意识到或被告知牙齿卫生的重要性没有规定（9）。
    此外，本研究结果把分别在2003-2004年和2010-2011年做的试验部分结果在2年前将其并置在一起。使用同样的方法将两个时期的结果聚集起来。重要的研究结果发表在第21届欧洲兽医牙科大会上，并编辑在下方表1中 。多年来，兽医学专家一直在不断地研究与牙周疾病有关的问题。
    最近出现的有关牙周病学最明显的研究趋势是有关牙周病的有效预防以及这对健康的重要性。一种含有褐藻的日粮配方---一种海藻提取物是一种预防性配方之一，作为一种口腔健康被动方法引起了极大的兴趣。不管是在人类还是兽医牙科学中，这个产品都显示出对口腔卫生能产生积极的作用。
    本研究的目的是评估含有褐藻的配方对犬猫的临床影响，采用的方法是“宠物微笑社会活动”制定和采用的方法，另外评估了牙菌斑的数量。不像其他研究，本研究采用口腔健康指数来评估产品的临床效果，而不是选定两个临床参数。

材料和方法

试验组
    试验组包括在诊所就诊的犬猫和工作人员，工作人员是完成了“犬猫的诊断和口腔卫生” 牙科教育计划并同意参加了相应的考试的人员。
    本研究的研究对象均是已接受预防措施的动物，不包括保护蜡的应用。没有为动物设定任何专门的饮食方案，但是，在整个研究中，按同一频率饲喂相同类型的饲料。无一动物被诊断为甲状腺功能亢进症。
    表1： 2003-2004和2010-2011在波兰进行的犬猫口腔健康评估结果对比

    在试验组中，给每只患病的犬猫饲喂含有褐藻的配方（Plaqueoff），具体用量是按生产商和经销商的建议进行的，即：10公斤以上的犬猫--½-1杯；10-25公斤以上的狗--1-2杯/天；25公斤以上的狗，3杯/天（15）。根据推荐的用量将配方添加到各犬猫爱好的日粮中。

对照组
    对照组中包括2012-2013兽医诊所中治疗的牙齿患病的宠物，存在口腔卫生问题，但是，没有获得有效的口腔卫生治疗，并且因各种原因没有饲喂任何口腔卫生产品。另外，在进行预防性保健措施后，没有使用保护蜡（3）。在试验期间，对所有的动物进行了检查，而且与试验组的试验方案相同，表2中描述的参数受到特别的控制。所有的检查由同一人执行。总之，对照组由6只狗和6只猫组成，年龄和身体状况与试验组相似。

研究和标准
    口腔健康检查是基于“宠物微笑预防措施活动”制定的方案的简化方案。用两天的课程可以详细介绍该方案，包括理论和实践两方面。此外，评估涉及沉积在牙冠表面上的牙菌斑。使用显示液（IM3制作的ICPlaque）或380nm的紫外光（图1-4）进行评估。本研究的框架包括下颌淋巴结的临床检查，其次是目检牙齿，看牙垢和牙菌斑覆盖面积的大小，以及评估整体的牙周状况。在临床意义上，牙周改变可视为牙周炎：牙齿松动、牙龈萎缩和牙齿位置改变。评估包括评估重要的牙齿和颊面，具体包括大齿、上颌第三颗切牙和第四前磨牙。这些牙齿的表面在临床检查中最方便检查，无需使用麻醉。
    口腔卫生指数（OHI）是基于临床评估进行的，包括表2中呈现的参数。记录的得分代表了口腔健康存在的潜在疾病，反映了整体的口腔健康指数。最低的得分，即0，意味着不存在任何疾病的迹象，最高分数，即意味着最严重的情况。
    在饲喂产品后0天、2周、4周、6周时记录研究结果。总之，计划每只动物每两周接受4次临床检查。使用Prism5.0绘图软件对口腔卫生指数进行统计分析。使用单变量方差分析对试验组和对照组的指数变化进行了统计分析，并使用了student t检验对试验组和对照组在检查日获得的研究结果进行了直接对比。

研究结果
    对照组包括3.5-6.5岁（平均4.5）体重为3-4.8公斤（平均3.95）的猫以及年龄4-8岁（平均5.67）体重为6-35公斤（平均18.5）的狗。

    表2：试验组和对照组临床研究的口腔健康指数（OHI）评估标准

    表3：在42天研究中对照组中动物的口腔健康指数的变化。同一行中的a b c值用不同的字母表示统计上的显著差异p<0.05。

    表4. 在42天研究中试验组中动物的口腔健康指数的变化。同一行中的a b c值用不同的字母表示统计上的显著差异p<0.05。

    图1： 狗–对照组中一只患病的狗，已评估口腔卫生指数；图2：用紫外线检查图1中的狗，以便看清楚存在的牙菌斑。该宠物的口腔卫生指数得分为2 (淋巴结 – 未变，牙龈 –未变，牙菌斑 – 多达牙齿表面的25%， 牙垢–多达牙齿表面的25%；图3：试验组中的一只猫，在使用产品后的6个月对口腔卫生指数进行评分；图4：给图3中的猫饲喂显示液以便看清楚牙菌斑。该宠物的口腔卫生指数得分为2
(淋巴结- 未变，牙龈炎，牙菌斑------多达25%，无牙垢)。
    表3中呈现了对照组动物口腔卫生指数的变化。记录了随着时间变化的、系统的口腔健康发展，并用犬猫在口腔卫生保健后的0-42天期间的口腔卫生指数统计显著差异来表示。对于个别患病的猫，在0天时，口腔卫生指数得分范围在0-1之间，在42天时，得分范围在2-5。而狗试验结果分别为：0-1和1-6。
   试验组包括24只动物：12只4-10岁（平均4.96岁）体重为3.25-8公斤（平均4.45）的猫，12只3.5-8岁（平均5.58岁）体重为7-40公斤（平均19）的狗，以及14个人，包括10名兽医，4名技术人员来执行试验组的研究。表4中呈现了试验组动物口腔健康指数的变化。
    此外，试验组在6周试验期间口腔健康状况有所改善，且显著低于对照组。就个别患病的猫而言，在0天记录的口腔卫生指数在0-2之间，42天在0-3之间。而狗的检测结果分别是0-2和1-3。

讨论
    对照组和试验组研究对象的选择主要在于排除之前先选定的没有完整结果患病宠物以及该患病宠物的观察结果或许受之前的处理或饲喂的药物所影响。对照组中等规模，但是获得的结果，尤其是观察到的口腔健康恶化的现象以及影响动物口腔健康的强度与文献中描述的非常类似（16-20）。
    对照组和试验组的基线临床评估是相似的。由于存在牙周病变，并且这些变化影响淋巴结，因此，基线条件不理想。然而，由于评估与配方对口腔变化发展的影响有关，而不是与基线条件有关，因此，并不影响研究结果。对照组的检查旨在说明未刷牙的动物口腔健康的恶化率。所获得的结果表明对照组中的两个物种（猫和狗）在6周后口腔健康都明显恶化，而且，这两个物种的恶化率是相似的。

    图5： 对照组和试验组狗的口腔健康指数。应用产品6周后，口腔健康指数上升减缓，而且从统计学的角度看差异显化(p=0.0166)。
    图6：对照组和试验组猫的口腔健康指数。应用产品6周后，口腔健康指数上升减缓，而且从统计学的角度看差异极显著(p=0.0064)。
    试验组评估的目标是确定饲喂含褐藻的配方对犬猫的口腔状态有何影响。结果表明，试验组动物的口腔卫生指数恶化明显减缓， 期间，口腔整体情况也比对照组更好，这主要是因为牙菌斑堆积缓慢，从而降低了对牙周组织和淋巴系统的不良影响 （图5，图6）。试验组和对照组的口腔卫生指数恶化率在评估期间均成比例，而没有显示口腔状况的任何关键时刻，相当于1.0-1.33（对照组）和0.42-0.5（试验组）。在狗的试验中，这些值分别是1-1.34 和0.42-0.68。
    在对照组和试验组使用产品42天以后（图1，图2），统计差异显著，这主要是由于试验组（狗）的口腔卫生指数整体提高为1.417（而对照组为3.167）和试验组（猫）为-1.417（对照组–4.117）。
    所描述的研究由十几个人进行。有关实地研究，所有的试验观察只由一个人进行，这方面的要求适用于涉及更精确的临床参数评价方法的研究（例如牙龈出血指数）。
    兽医口腔卫生委员会(VOHC)研究要求更严格和具体，具体请见www.vohc.org（21）。在研究中所采用的方法的可信性和重现性首先是基于所有的参与者接受了相同培训，培训老师和培训方法均是一样的，而且方法本身是比较简单，不太受人为因素的影响。
    被研究的犬猫生长在不同环境条件下，所饲喂的饲料可能也是由不同的厂家所生产，但是，所有被研究对象均未饲喂其他的卫生保健产品。
    根据本研究结果，含有褐藻的配方可被视为一种被动保健方式，因为在试验组显示了特定的健康变化。
    值得一提的是，建议增加试验组的被研究对象数量并延长观察时间，特别是因为对照组和试验组之间在6周后在统计学意义上存着显著差异，甚至在使用产品2周后就发生改变。
    讨论的一个重要点是口腔卫生结果的比较分析，具体见表1。通过试验组中相当高比例的宠物研究结果表明波兰的犬猫宠物主人现在更加文明。在狗方面的口腔卫生保健百分比数字几乎翻了一番，而在猫方面，增加了2%。有趣的是，这些宠物的健康指数均显著改善，最重要的发现是牙周疾病的患病动物数量下降了3%。
    在猫的研究中，非常显著的一点是，在两个研究期未进行口腔保健的动物的数量非常相似（71.4%和70.4%）。这种情况在狗的研究上看起来更好，但仍然有33.9%的狗没有得到适当的牙齿护理。关于研究结果，应考虑以下几点：首先，研究中包括看兽医的宠物主人，因此可能将比例错误地提高了；其次–即使接受卫生检查的宠物数量在增加，但是病理病变的比例并没有明显减少。 
 研究结果总结
    总体而言，每日刷牙被认为是口腔卫生的黄金标准，构成主动保健的一个要素（22）。此外，事实上，许多宠物主人都在寻求更容易的保健方式，教宠物保持刷牙的习惯需要系统给的训练，不是所有患有牙齿疾病的患者（特别是猫）愿意参加刷牙这样的卫生保健活动。